聚合酶链式反应？聚合酶链式反应的原理

本篇文章给大家谈谈聚合酶链式反应，以及聚合酶链式反应的原理对应的知识点，文章可能有点长，但是希望大家可以阅读完，增长自己的知识，最重要的是希望对各位有所帮助，可以解决了您的问题，不要忘了收藏本站喔。

一、聚合酶链式反应的原理

1、聚合酶链式反应之所以灵敏度比较高，就是因为聚合酶链式反应原理，目前聚合酶链式反应可以检测DNA的情况，对于生物学领域来说，聚合酶链式反应有很大的帮助，接下来我们来具体了解一下聚合酶链式反应的原理有哪些吧。

2、聚合酶链式反应已经相对成熟了，那么聚合酶链式反应的原理及功能是什么呢？

3、聚合酶链式反应是在试管中进行DNA复制反应，基本原理与体内相似，不同之处是耐热的Taq酶取代DNA聚合酶，用合成的DNA引物替代RNA引物，用加热(变性)、冷却(退火、保温(延伸)等改变温度的办法使DNA得以复制，反复进行变性、退火、延伸循环，就可使DNA无限扩增。

4、聚合酶链式反应能快速特异扩增任何已知目的基因或DNA片段，并能轻易在皮克(pg)水平起始DNA混合物中的目的基因扩增达到纳克、微克、毫克级的特异性DNA片段。因此，聚合酶链式反应技术一经问世就被迅速而广泛地用于分子生物学的各个领域。通常需要检查的人群为疑似某种特定的疾病病人，进行分子特异性检查。

5、聚合酶链式反应一般要在实验室进行，那么聚合酶链式反应的原理和过程什么呢？

6、聚合酶链式反应就是将聚合酶链式反应反应体系升温至95℃左右，双链的DNA模板就解开成两条单链，此过程为变性。然后将温度降至引物的Km值以下，3端与5端的引物各自与两条单链DNA模板的互补区域结合，此过程称为退火。当将反应体系的温度升至70℃左右时，耐热的Taq DNA聚合酶催化四种脱氧核糖核苷酸按照模板DNA的核苷酸序列的互补方式依次加至引物的3端，形成新生的DNA链。每一次循环使反应体系中的DNA分子数增加约一倍。

7、聚合酶链式反应理论上循环几次，就增加为2^n倍。当经30次循环后，DNA产量达2^30拷贝，约为10^9个拷贝。聚合酶链式反应扩增过程见图8-1。由于实际上扩增效率达不到2倍，因而应为(1 R)^n，R为扩增效率。

8、聚合酶链式反应这项技术已经相对完善，那么聚合酶链式反应的原理及技术怎么样呢？

9、聚合酶链式反应的原理就是DNA的半保留复制。聚合酶链式反应反应中变性这一步很重要，若不能使模板DNA和聚合酶链式反应产物完全变性，聚合酶链式反应反应就不能成功，DNA分子中G C含量愈多，要求的变性温度愈高。太高的变性温度和时间又会影响Taq酶的活性，通常的变性温度和时间分别为95℃、30s，有时用97℃、15s。

10、虽然DNA链在变性温度时两链分离只需几秒钟，但反应管内部达到所需温度还需要一定的时间，团此要适当延长时间。为了保证模板DNA能彻底变性.最好为7-10min，然后在以后的循环中，将变性步骤设为95℃/min。

11、聚合酶链式反应灵敏度是比较高的，那么聚合酶链式反应的原理是什么呢？

12、聚合酶链式反应的原理是双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。但是，DNA聚合酶在高温时会失活，因此，每次循环都得加入新的DNA聚合酶，不仅操作烦琐，而且价格昂贵，制约了PCR技术的应用和发展。耐热DNA聚合酶-Taq酶的发现对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。

13、聚合酶链式反应的延伸温度一般为72℃左右，此时Taq酶活性为每秒钟掺入核苷酸35-100个，2kb的片段用1min已足够，若DNA片段较长，扩增时间可适当延长。聚合酶链式反应延伸时间过长又可引起非特异性扩增。

二、什么是聚合酶链式反应

1、聚合酶链式反应（英文：Polymerase chain reaction，缩写：PCR），是一种分子生物学技术，用于扩增特定的DNA片段，这种方法可在生物体外进行，不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物体。

2、这种方法由凯利·穆利斯（Kary Mullis）于1983年开发，当时他是Cetus公司的雇员，也是1993年诺贝尔化学奖的获得者，它是一种简单，廉价和可靠的方法复制DNA片段，这个概念适用于现代生物学和相关科学的许多领域。 PCR可能是分子生物学中使用最广泛的技术。这种技术被用于生物医学研究，犯罪取证和分子考古学。

3、微生物复制是一个费时耗力的流程，首先要将DNA经限制酶剪裁，再利用连接酶（Ligase）加到载体（Vector）中，之后利用瞬间电击（Electroporation）或是热休克（Heat Shock）的方式，送到大肠杆菌感受态细胞（competent cell）中，将此菌于培养皿大量繁殖培养，再经过繁复的分离、纯化过程，时间通常需要近一周，才能大量复制片段。

4、所以仅需一小时的PCR能节省大量时间和繁复的操作，聚合酶链式反应技术被广泛地运用在医学和生物学的实验室，例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊断、基因复制，以及亲子鉴定。

三、什么叫聚合酶链式反应

1、聚合酶链式反应（英文：Polymerase chain reaction，缩写：PCR），是一种分子生物学技术，用于扩增特定的DNA片段，这种方法可在生物体外进行，不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物体。

2、这种方法由凯利·穆利斯（Kary Mullis）于1983年开发，当时他是Cetus公司的雇员，也是1993年诺贝尔化学奖的获得者，它是一种简单，廉价和可靠的方法复制DNA片段，这个概念适用于现代生物学和相关科学的许多领域。 PCR可能是分子生物学中使用最广泛的技术。这种技术被用于生物医学研究，犯罪取证和分子考古学。

3、微生物复制是一个费时耗力的流程，首先要将DNA经限制酶剪裁，再利用连接酶（Ligase）加到载体（Vector）中，之后利用瞬间电击（Electroporation）或是热休克（Heat Shock）的方式，送到大肠杆菌感受态细胞（competent cell）中，将此菌于培养皿大量繁殖培养，再经过繁复的分离、纯化过程，时间通常需要近一周，才能大量复制片段。

4、所以仅需一小时的PCR能节省大量时间和繁复的操作，聚合酶链式反应技术被广泛地运用在医学和生物学的实验室，例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊断、基因复制，以及亲子鉴定。

四、什么是多聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction:PCR)

聚合酶链式反应（英文全称：Polymerase Chain Reaction），简称PCR。聚合酶链式反应(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火（复性）及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断或任何有DNA,RNA的地方．聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，简称PCR）又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。

具体请参见：://baike.baidu/view/2764.htm

OK，关于聚合酶链式反应和聚合酶链式反应的原理的内容到此结束了，希望对大家有所帮助。